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利用壓力循環(huán)技術(shù)從土壤中提取病原DNA(PCT 壓力循環(huán)技術(shù) 樣品制備)

  更新時間:2009-06-04 點擊量:1520

領(lǐng)域:分子診斷用于植物病理學(xué) 關(guān)鍵詞:PCT 壓力循環(huán)技術(shù) 樣品制備 細(xì)胞破碎

 
在低密度病原及一些較難提取樣品中,檢測及定量分析絲核菌、腐霉菌及其它通過土壤傳播的病原體時,盡管利用的是快速診斷裝置如實時定量PCR,但結(jié)果極其不穩(wěn)定。原因在于,樣品制備在生物樣品制備過程中一直是一個瓶頸。一些特殊的DNA,RNA及小分子采用傳統(tǒng)的方法無法有效地提取出來。目前,哈佛的科學(xué)家們發(fā)明了種全新的儀器:PCT SPS壓力循環(huán)樣品制備系統(tǒng),可以有效地解決這個問題。該系統(tǒng)的優(yōu)點在于:重現(xiàn)性好,效率高,快速,安全,平行性好。
 
這套系統(tǒng)中,樣品在特定條件下被置于流體靜壓循環(huán)中(從周界壓力到35000psi),以此來提高從土壤中提取絲核菌、腐霉菌中DNA的提取率。 這項全新的技術(shù)——壓力循環(huán)技術(shù)(PCTPRESSURE CYCLING TECHNOLOGY),與其它方法相比,可以將從土壤中提取絲核菌、腐霉菌中DNA的效率提高2-30倍。 利用PCT SPS壓力循環(huán)樣品制備系統(tǒng),我們從小麥根部獲得可檢測的絲核菌DNA,這種小麥根部很難進行均質(zhì)。在80%這樣的根部樣品中,必須要提取出足夠量的病原DNA,才可以用實時PCR進行定量分析。而且,由于PCT SPS是一個封閉系統(tǒng), 樣品不會受到采用研磨方法時污染。PCT SPS在種質(zhì)篩選、食品究全評估、宿主細(xì)胞和微菌核酸分別描述方面有著重要的作用和*的優(yōu)勢。
 

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